小鼠II型肺泡上皮细胞分离自肺组织;肺泡肺内最基本的呼吸单位,是气体交换的主要场所,是多面形的薄膜囊泡,一面与肺泡囊或肺泡管相通,其他各面与肺泡毛细血管网或相邻的肺泡相接。
肺泡壁表面覆盖有肺泡上皮,肺泡之间有一薄层结缔组织,内含丰富的毛细血管网及大量的弹力纤维和巨噬细胞,肺泡壁上有小孔,称肺泡孔,肺泡与毛细血管间的隔膜称气血屏障,它十分菲薄,由毛细血管内皮、基底膜和肺泡上皮、基底膜及其间弹力纤维、胶原纤维等组成,肺泡细胞又叫粒性细胞、大肺泡细胞,系肺泡上皮细胞的一种。
小鼠II型肺泡上皮细胞采用胰蛋白酶-胶原酶混合灌注消化法结合差速贴壁法,并通过上皮细胞专用培养基培养筛选制备而来,是肺细胞的主要类型之一,可用于分析肺上皮细胞对外界因素的反应,对于研究肺的发育、损伤和修复。
次分离小鼠肺泡上皮细胞是很棘手的,肺上皮细胞周围有大量的白细胞和内皮细胞需要分离。更复杂的是需要通过分散酶消化而从肺的细胞外基质中释放出来,分散酶能特异性地裂解存在于基底膜中的IV型胶原蛋白和纤连蛋白,需要通过气管艰难地注入,是各高校及研究的细胞学、免疫学、病理学、生物医学、临床医学等实验室常备细胞。
肺泡上皮细胞体形极微,表面有由磷脂双分子层与镶嵌的蛋白质及糖被构成的生物膜,内含遗传物质,无机物有机物两大类化学物质。细胞增殖是以一分为二的形式进行分裂,通过选择法或克隆形成法从原代培养物或细胞系中获得具有特殊性质或标志物的培养物,是用单细胞分离培养或通过筛选的方法,由单细胞增殖形成的细胞群,将冻存在-196℃液氮中的细胞快速融化至37℃,使肺泡上皮细胞|细胞外冻存时的冰晶迅速融化,避免冰晶缓慢融化时进入细胞形成再结晶,对细胞造成损害。